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小伙伴們在上篇學習了ELISA實驗的原理、類型，并且根據自己的需求選擇了適合自己的試劑盒，那接下來就是ELISA的實操了，包括哪些實驗步驟和注意事項呢？快來和小愛一探究竟吧！ELISA實驗步驟圖1ELISA標準實驗流程1、樣本采集：a）血漿：采集血漿時可使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝血劑。采集后30min內，1000xg離心15min。立即檢測或分裝后于≤-20℃儲存。避免反復凍融。b）細胞培養上清液：通過離心去除顆粒，立即檢測或分裝后將樣品于≤-20°C儲存。避免反復...

作為常見實驗技能之一的ELISA已經成功逼瘋了一大批研究生：加樣加到手抽筋，拍板拍到人發瘋。為此，小愛嘔心瀝血寫了一份ELISA實驗詳解，原理、步驟、注意事項一網打盡，幫助各位小伙伴快速入門并精通ELISA（分為上下兩篇噢）。ELISA實驗原理酶聯免疫吸附試驗(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，簡稱ELISA)，是一種利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法，是免疫學經典實驗方法。ELISA可適用多種樣本類型，主要包括血清、血漿、細...

提到細胞凋亡，想必大家都不陌生，咱們這個領域的，先不說本科的時候學過，考研的時候怎么說它也是重要考點之一。或許此時您的腦袋瓜子里立馬浮現出課本上那個經典的凋亡信號通路圖......額，還有點記不清......沒關系，今天小編帶您回顧一下經典的細胞凋亡信號通路，再看看它常見的檢測方法。☆細胞凋亡1）細胞凋亡是一種細胞主動有序的死亡，它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等作用，它并不是病理條件下自體損傷的一種現象，而是為了更好地適應生存環境而主動爭取的一種死亡。2）細胞凋亡相關信...

什么是TR-FRET？TR-FRET（Time-ResolvedFluorescenceResonanceEnergyTransfer，時間分辨熒光共振能量轉移）是一種用于研究分子間相互作用的生物物理技術。它結合了兩種技術：熒光共振能量轉移(FRET)和時間分辨熒光(TRF，Time-ResolvedFluorescence)。熒光共振能量轉移原理圖熒光共振能量轉移(FRET)是一種物理現象，其中一個熒光分子（供體）在吸收光能后，可以將激發能量非放射性地傳遞給另一個分子（受體...

它們的概念分別是什么？PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR這四種技術都是基于聚合酶鏈式反應（PCR）的技術，但是它們之間存在一些區別。PCR：聚合酶鏈式反應（PCR）是一種體外擴增DNA分子的技術，利用DNA聚合酶和多個引物在所需溫度下擴增目標DNA分子。PCR反應分為三個階段：預變性、變性-退火-延伸和延伸。PCR技術主要用于DNA序列的擴增和檢測，應用廣泛，如基因克隆、DNA序列測定等。qPCR：實時定量聚合酶鏈式反應（qPCR）是一種實時檢測PCR過程中熒光信...

在生物學實驗中，二抗的選擇至關重要。其中，HRP酶標二抗和熒光二抗是兩種常見的二抗類型，它們各具特色，并在不同的實驗場景下發揮著關鍵作用。一、HRP酶標二抗1.定義及特性HRP酶標二抗，即辣根過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)標記的二抗，是生物學實驗常規用的二抗。其特點包括比活性高、穩定性好、分子量小、純酶容易制備等，因此在免疫學實驗中廣泛應用。2.應用場景HRP酶標二抗常用于如免疫印跡(WB)、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)以及免疫組織化學(I...

細胞是生命的基本單位，是生物學研究中非常有用的工具。細胞培養的過程就是人工模擬細胞體內生長環境，置于無菌、適宜溫度及酸堿度的環境中，保證充足的營養使其不斷生長繁殖，并維持其結構和功能。作為基礎又常規的實驗技能，自然頗受關注。后續會創建《常見細胞培養攻略》系列，會為大家介紹一些常見細胞的培養方案，包括但不限于T細胞、B細胞、NK細胞、巨噬細胞、干細胞培養等。今天主要是細胞培養入門指南的相關內容，其他的內容大家可以持續關注追更。1.細胞類型1)原代細胞(primarycell)：...

在當今生物醫學研究領域，多重熒光免疫組化(mIHC)技術正變得越來越重要。這項技術能夠在單一組織切片上同時檢測多種蛋白質，為我們提供了一個強大的工具，以揭示細胞和組織內部復雜的生物學信息。隨著多重熒光免疫組化技術的不斷發展，越來越多老師希望在自己的片子上看到更豐富的靶標信息，意味著我們需要用到更多種熒光染料去完成染色，但由于熒光染料產生的信號不是單純的線性，而是呈現山峰狀的分布，在最高點信號固然最好，但在最高點左右的一段范圍內都能夠捕獲到它的信號，那么相鄰的染料之間，難免會有...