細胞培養是個辛苦活，根本離不了人。新冠病毒肺炎疫情之下，不知道您實驗室里養的細胞可還好？

當然，合理運用細胞凍存和復蘇技術可以幫助您省心度過假期。不過也有不少小伙伴向小愛哭訴，自己辛辛苦苦養的細胞凍存復蘇后失活，復蘇出來后活著的細胞就沒幾個了……

辛辛苦苦好一陣、一夜回到解放前的感覺不好受，那么細胞凍存復蘇后失活的原因為何呢？我們又該如何去規避呢？

其實目前實驗室進行細胞凍存大多采用10%DMSO或甘油+10%到20%牛血清+培養基作為細胞凍存液，這種非玻璃化凍存的方式，操作中我們常規會注意慢凍快融以及分階段降溫等，但是冷凍過慢則引起細胞脫水失活，冷凍稍快又容易形成冰晶，無論如何都難以*避免細胞損傷。
 

與非玻璃化凍存相對的，細胞凍存理想的方式無疑是超快速玻璃化凍存。

玻璃化凍存利用多種冷凍保護劑聯合形成的玻璃化冷凍保護液保護懸浮細胞，當細胞內外玻璃化冷凍時，不會形成冰晶或只形成很微小的冰晶，不會對細胞膜和細胞器造成損傷。凍存細胞放-80℃冰箱24h后即可移至液氮罐長期保存。

限制細胞玻璃化凍存廣泛應用的，主要是其需要配置較復雜的凍存液，且配方使用需經優化。這些煩心煩人的工作交給我們，現在，愛必信有心、有愛研發推出即用型無血清細胞凍存液（貨號abs9417），無需程序降溫，適用更廣泛的細胞類型，尤其對干細胞以及原代細胞有*的凍存效果。生產過程嚴格執行cGMP操作標準。

使用我們的細胞凍存液進行凍存和復蘇操作相當簡單。
 

1）細胞凍存操作方法：

選擇對數生長期的細胞凍存，有助于提高細胞復蘇存活率。 
1、按照常規方法懸浮細胞或貼壁細胞收集于離心管中。 
2、1000rpm-1500rpm，5min 離心，棄上清液。 
3、加入適量的無血清細胞凍存液于離心管中，推薦細胞凍存濃度為 1×10⁶ - 1×10⁷ cells/ml。緩慢混合均勻，制成細胞懸液。 
4、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示的冷凍保存管中。 
5、將凍存細胞放入-80℃冰箱，24h后轉入移至-196℃液氮罐長期冷凍保存。 

2）細胞復蘇操作方法： 
1、從液氮罐取出凍存細胞，立即放入 37℃水浴鍋或其他細胞復蘇設備中，快速融化。 
2、準備離心管，加入 2 倍凍存細胞體積的細胞培養基，待凍存管中細胞*融化后，將凍 存細胞懸液緩慢加入離心管中。 
3、1200-1500rpm 5min 離心，棄上清。 
4、加入適量新鮮培養基，使用移液管緩慢懸浮細胞，并將細胞轉染細胞培養皿/瓶中，顯微鏡下觀察細胞狀態，放入細胞培養箱中培養。 
5、24h 后觀察細胞狀態，并更換新鮮細胞培養液。

同時，我們也研發推出了治療級的無血清細胞凍存液abs9413，內毒素水平遠低于藥典標準，助力您的哺乳動物細胞和間充質干細胞的凍存。
 

如需凍存胚胎干細胞/誘導多能干細胞（ES/iPS）更推薦使用ES/iPS細胞凍存液（abs9412）。

辛辛苦苦培養的細胞，再也不會“一夜回到解放前”啦！

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