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首頁 > 產品中心 > 細胞生物學 > 外泌體研究 > abs50040細胞上清外泌體提取試劑盒

細胞上清外泌體提取試劑盒

簡要描述:細胞上清外泌體提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于細胞培養上清液中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,可用于電鏡分析、NTA 粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。

  • 產品型號:abs50040
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-07-09
  • 訪  問  量:813

詳細介紹

品牌absin貨號abs50040
規格20T供貨周期現貨
應用領域環保,化工,生物產業,農業,綜合

描述:

外泌體是由細胞分泌的包含 RNA 和蛋白質的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能,在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子;然而其構造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。本外泌體快速提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于細胞培養上清液中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,可用于電鏡分析、NTA 粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。


產品組分

組分名稱規格保存
Exosome Concentration Solution(RNase/DNase Free, Sterile)100ml室溫
Exosome Purification Filter
(RNase/DNase Free, Sterile)
20Tubes  室溫








使用方法:

自備材料:
1、高速離心機(可達到 10000 g 離心力),渦旋振蕩器; 2mL 離心轉子;1.5 mL 離心管;
2、1×PBS 緩沖液(無菌); 


一、樣品預處理:
 1、取樣:如果是凍存樣品,從冰箱取出后于 25℃水浴中進行解凍,將wan全融化后的樣品置于冰上;如果是新鮮樣品,收集樣品后置于冰上;
 2、樣品初始用量:(單次提取時的樣品量)  

樣品名稱 zui低量
細胞培養上清液20ml


 


3、離心去細胞碎片:將樣品轉移至離心管中,于 4℃以 3000 g 離心 10 min,去除樣品中的細胞碎片;(注:若沉淀較多,可 3000g/10min離心多次至無明顯沉淀,每次取離心上清液)
 4、上清液轉移:去除細胞碎片的離心上清液轉移到新的 50mL 離心管中; 


二、提取外泌體:
 1、上清液預處理:在去除雜質的離心上清液中加入 Exosome Concentration Solution(ECS 試劑),具體的加入劑量如下:(其他劑量請根據表中的試劑用量等比例換算)  

樣品名稱樣品劑量加入ECS劑量
細胞培養上清液 20ml5ml




2、溶液混合:加入 ECS 試劑后將離心管蓋緊,通過渦旋振蕩器混勻1min,再放置于4℃靜置至少2h;(增加靜置時間可提高外泌體得率,但靜置時間不可超過 24h)
3、沉淀外泌體:取出裝有混合液的離心管于 4℃以 10000g離心 60min,棄上清,沉淀中富含外泌體顆粒;(注:盡可能吸凈上清液)
4、外泌體重懸:取 1×PBS 均勻吹打離心沉淀物(具體加入劑量如下表),待其溶解后,將重懸液轉移至新的 1.5 mL 離心管中; 

細胞上清樣品體積 加入PBS劑量
20ml0.2ml


注:其他劑量請根據表中的試劑用量等比例換算
5、收獲外泌體顆粒:將含有重懸液的 1.5 mL 離心管于 4℃以 12000 g 離心 2 min,保留上清液,該上清液中富含外泌體顆粒。
(注:若沉淀較多,可 12000 g /2min 離心多次至無明顯沉淀,每次取離心上清液) 


三、純化外泌體:
1、純化外泌體:將收獲的外泌體顆粒粗品轉入 Exosome Purification Filter(EPF 柱)上室中,于 4℃以 3000 g 離心 10 min,離心后收集 EPF 柱管底的液體,此液體即為純化后的外泌體顆粒;(注:EPF 柱不可重復使用)
 2、外泌體的保存: 純化后的外泌 體以50-100 μL 進行分裝保存于-80℃低溫冰箱中,以備后繼實驗使用。  


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