大家都知道基質膠用途廣泛,無論在成瘤、成管、干細胞包被,還是類器官培養中,都需要基質膠這個得力助手。但基質膠也是有“怪脾氣"的,稍有懈怠,它就凝給我們看,還死倔死倔地“不干活"嘞,所以咱們聊一聊基質膠有哪些“怪脾氣"!
1、融化時間非常短,對高溫過度“敏感"
有小伙伴,是把基質膠放在冰盒上融化的,冰盒是放在超凈臺上的,發現過了半小時基質膠凝了。是的,為啥呢?
基質膠如果不是全部插在冰里,一半暴露在空氣中,其融化時間很短,通常在冰上不超過30min就基本液化了,尤其是在炎熱的夏天,暴露在空氣中的一半很快會因為溫度過高而凝固掉,所以,基質膠較好的融化方法是在4℃冰箱過夜融化。
2、當基質膠不小心凝固后,當天是不愿意再“干活"嘞
當我們不小心讓基質膠凝固了以后,采用冰水化合物降溫,采用4℃靜置2h,采用-20℃靜置10min,都無法“換醒"基質膠,它就靜靜凝在那里“無動于衷"。是的,這就是基質膠的“怪脾氣",“不搭理"人了。正確做法是先放-20℃,讓它進入“冬眠"2h,然后放在4℃過夜融化,等第二天它就“流動"起來了,因為它“消氣"著實慢呀。
3、基質膠能反復凍融嗎?用不完咋辦?
基質膠反復凍融,流動性會變差,用不完可以分裝到EP管凍存,為了減少反復凍融,我們推出的基質膠1.5mL 4(abs9495)支裝的,每次用時,取出一支4℃過夜融化。如果一支用不完,可以放在4℃保存1個月,依然保持很好的流動性。
4、基質膠融化完或使用時發現有氣泡咋辦?
基質膠本身富含多種蛋白,粘滯性大,出現“吐氣泡"現象的原因主要是流動性變差。如果出現氣泡,使用時可以用桌面離心機2000r離1min,可有效去除小氣泡。
5、培養類器官時,怎樣避免基質膠很快凝固?
采用金屬冰盒,效果更好,點膠前,將冰盒,槍頭,離心管,EP管放-20℃預冷1h以上,也就是和基質膠接觸的東西(除孔板外)都進行充分預冷,可以有效避免基質膠凝固。
6、類器官傳代時,基質膠和細胞團分不開咋辦?
首先咱們可以采取一些有效的措施促進兩者分離:
1)加入適量(10-14mL)緩沖液,稀釋基質膠類器官混合物,能促進分離;
2)將基質膠類器官混合物放于-20℃,5min,加速基質膠液化,能促進分離;或者4℃靜置40min促進基質膠液化;
3)離心機的選擇非常重要,水平角離心機相比固定角離心機更利于基質膠和類器官分離;
4)離心機的溫度最好是4℃(可避免基質膠固化),離心轉速可適當提高(最高不要超過500g),離心時間可適當加長(最常不超過10min)。
其次如果采取了上述措施,基質膠還是存在少量殘留怎么辦?
不要慌,如下圖所示,可以看到基質膠和細胞團混在一起(基質膠里的白點為細胞團)。此時,我們可以摒棄掉上層緩沖液及基質膠的上1/3,保留下2/3基質膠細胞團混懸物,并加新膠,混合點板。
7、基質膠用途多多,不同基質膠有不同用途,如下表:
貨號 | 品名 | 規格 | 應用 |
abs9490 | 基質膠(標準型,含酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | 類器官培養;細胞侵襲;細胞遷移 |
abs9491 | 基質膠(標準型,無酚紅) | 1.5mL×8 | |
abs9492 | 基質膠(高濃度,含酚紅) | 1.5mL×8 | 小鼠皮下成瘤;血管生成;凝膠栓塞 |
abs9493 | 基質膠(高濃度,無酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | |
abs9494 | 基質膠(低因子,含酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | 類器官培養;與生長因子、信號途徑等相關的研究 |
abs9495 | 基質膠(低因子,無酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | |
abs9497 | 基質膠(高濃度,低因子,含酚紅) | 1.5mL×8 | 小鼠皮下成瘤;血管生成;凝膠栓塞;與生長因子、信號途徑等相關的研究 |
abs9498 | 基質膠(高濃度,低因子,無酚紅) | 1.5mL×8 | |
abs9496 | 基質膠(IPS驗證無酚紅) | 1.5mL×4 | 包被孔板,適用于人胚胎干細胞hES、誘導多能干細胞IPS 的擴增和維持 |
abs9410 | 即用型基質膠 | 100mL | 包被孔板,適用于難貼壁細胞(如293T,HUVEC)的擴增和維持 |
8、另外買任意規格基質膠,就送金屬冰盒,可以累加,此外還有買類器官試劑盒送培訓班活動哦!!
本期小愛推薦:
貨號 | 品名 | 規格 |
abs9495 | 基質膠(低因子、無酚紅) | 1.5ml*4/1.5ml*8 |
abs9446 | Organotial人乳腺癌類器官培養試劑盒 | 1kit |
abs9558 | Organotial人卵巢癌類器官培養試劑盒 | 1kit |
abs9590 | Organotial人宮頸癌類器官培養試劑盒 | 1kit |
abs9739 | Organotial人腦膠質瘤類器官培養試劑盒 | 1kit |
abs9589 | Organotial人鼻咽癌類器官培養試劑盒 | 1kit |
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