mRNA（信使RNA）轉染是一種將外源mRNA引入細胞內的技術，以實現特定蛋白質的表達或基因治療的方法。mRNA轉染可以繞過基因組中的DNA轉錄和核糖體轉錄過程，直接將所需的mRNA傳遞到細胞內，從而實現蛋白質的合成。

使用mRNA轉染技術有多種優勢：

1）相比于DNA轉染，mRNA轉染不需要經過核轉錄和DNA復制等步驟，可以更快速地實現蛋白質的合成；
2）由于mRNA轉染不涉及基因組的改變，避免了可能引發的不良基因突變和免疫應答等問題；
3）mRNA轉染還具有可調控性強、轉染效率高以及適用范圍廣等優點。

在實際應用中，mRNA轉染被廣泛用于基因治療、疫苗研發以及細胞工程等領域。mRNA轉染試劑（abs60339）是愛必信推出的專為真核細胞進行mRNA轉染開發的mRNA專用轉染試劑，可用于在多種貼壁細胞或懸浮細胞中遞送mRNA。可直接將mRNA從細胞外傳遞到細胞質中進行表達，這避免了轉錄調控作用的影響以及進入細胞核的限制，可被廣泛應用于短期蛋白表達的相關研究工作。

產品亮點：

? 專用于mRNA轉染，可用于多種貼壁細胞或懸浮細胞；
? 在各種常規細胞、難轉的原代細胞或干細胞中均具有較高的轉染效率；
? 不受血清影響，轉染前后無需更換培養基；
? 產品性能穩定，毒性低，操作簡單，重復性好。

實驗操作步驟：

以24孔板為例：

1）細胞接種：每孔接種0.5-1.0×10⁵個細胞，細胞培養12-24小時，使轉染時細胞密度達到60-70%融合度；
2）mRNA稀釋：將mRNA稀釋于Opti-MEM培養基中，終濃度0.1mg/mL；
3）復合物制備：取2uL的mRNA轉染試劑原液加入到8uL Opti-MEM培養基中，取4uL濃度為0.1mg/mL的mRNA加入到6uL Opti-MEM培養基中，兩者等體積混合；
4）室溫靜置10分鐘；
5）無需等待，每孔20uL復合物加入細胞培養板中，混勻，37℃培養18-48小時后檢測基因表達，無需更換培養基。

實驗案例展示：

1、適用范圍廣泛：使用Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）在不同類型細胞包括293T細胞、B16F10細胞、MCF-7細胞、LX2細胞、MC38細胞、LLC細胞、MDA-MB-231細胞、Jurkat細胞中轉染EGFP mRNA，處理細胞24h后利用熒光顯微鏡拍照，發現Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）在各類細胞中均取得了較好的轉染效果。

圖1 mRNA轉染試劑（abs60339）轉染EGFP mRNA至各種類型類細胞

2、轉染效率高：使用Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）和不同競品mRNA轉染試劑在B16F10細胞中轉染EGFP mRNA，處理細胞24h后，利用流式細胞儀檢測EGFP mRNA的轉染效率。結果表明不同比例的Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）轉染效率均高于競品轉染試劑。

圖2 mRNA轉染試劑（abs60339）不用轉染試劑轉染效率對比結果

備注：圖例中不同柱子顏色代表轉染試劑和mRNA的比例[轉染試劑體積（μL）:mRNA的質量（μg）]，縱坐標的數值代表轉染效率。

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