SARS-CoV-2(coronavirus disease 2019)疫情暴發以來,各個國家采取了多種控制措施,但仍造成了大量的感染和死亡病例。世界衛生組織(World Health Organization,WHO)統計數據顯示,截至2023年2月3日,全球SARS-CoV-2累計確診病例7.54億例,死亡病例達到681萬例。目前,雖然我國已經解除對SARS-CoV-2采取的甲類傳染病管控措施,但是SARS-CoV-2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)仍然在變異,重復感染的風險仍然存在。疫苗接種和抗病藥物的使用是控制傳染病的有效手段。而疫苗被認為是全球戰勝SARS-CoV-2疫情的最終希望。
自SARS-CoV-2疫情爆發以來,滅活疫苗、重組蛋白亞單位疫苗、病毒載體疫苗、DNA載體疫苗和mRNA疫苗等五大技術路線的過百個疫苗研發項目在全球緊急啟動。mRNA疫苗相比于其他類型的疫苗,具有安全性高、生產成本低、生產周期短,能更好滿足全球疫情對疫苗劑量的迫切需求以及易于開發針對變異病毒株新疫苗等優勢,已在全球掀起了研發高潮。據統計,我國大約有16款mRNA SARS-CoV-2在研。疫情退去,后續上市的疫苗還能獲得多大的商業化價值尚未可知,但布局mRNA疫苗是一個入場mRNA療法這一新興領域的重要步驟。
mRNA疫苗/藥物的工作機制清晰,經由脂質納米顆粒包裹的mRNA進入體內后被細胞所攝取,納米脂質顆粒在胞內解開后釋放出mRNA,隨后利用體內的氨基酸進行自然的蛋白翻譯,從而發揮其藥物/疫苗功能。mRNA的體外合成制備、保持穩定性和細胞內遞送是mRNA藥物/疫苗研發的關鍵技術。
圖1 mRNA疫苗/藥物原理
其中合成LNP包裹的mRNA流程大致經過模板制備、體外轉錄、純化和載體包裹等環節:
圖2 LNP-mRNA合成流程
圖3 mRNA合成產品總覽(酶法加帽法)
一、模板制備:
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
abs60251 | 重組高熱穩定DNA 聚合酶 | 1000U |
abs44058811 | dNTP Mix (25 mM each) | 250ul |
abs60036 | 2×Taq PCR Mix | 1ml*50 |
abs60034 | 2× Xerox PCR Master Mix | 1ml×5 |
abs60056 | 2×Pfu Master Mix | 1ml×5 |
abs60055 | 2×Pfu Master Mix(Quick Load) | 1ml×5 |
abs60084 | T4 DNA Ligase | 500U×10 |
abs60250 | 快速多片段DNA組裝預混液 | 50T |
abs60024 | 無內毒素高純度質粒大量快速提取試劑盒 | 10T |
abs60023 | 無內毒素高純度質粒小量快速提取試劑盒 | 50T |
二、體外轉錄:
分類 | 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
酶產品 | abs60153 | T7 RNA 聚合酶 | 1000KU |
abs60170 | 無機焦磷酸酶 | 100KU | |
abs60172 | 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase Ⅰ) | 10000U | |
abs60249 | 重組表達的鼠源RNase抑制劑 | 10000U | |
abs60150 | RNA酶抑制劑 | 40000U | |
核苷酸原料 | abs60159 | ATP Sodium salt solution(100 mM) | 1ml×3 |
abs60163 | CTP Sodium salt solution(100 mM) | 1ml×3 | |
abs60164 | GTP Sodium salt solution(100 mM) | 1ml×3 | |
abs60165 | UTP Sodium salt solution(100mM) | 1ml×3 | |
修飾堿基 | abs60155 | 假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液 | 1ml |
abs60156 | N1-甲基-假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液 | 1ml | |
abs60168 | 5-甲基-CTP鈉鹽溶液 | 1ml | |
abs60169 | 5-甲氧基-UTP鈉鹽溶液 | 1ml | |
abs60185 | 假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60186 | N1-甲基-假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60187 | N6-甲基-ATP鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60188 | 5-甲基-CTP鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60189 | 5-甲氧基-UTP鋰鹽溶液 | 50ul |
三、RNA加帽(酶法加帽法)
分類 | 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
酶產品 | abs60153 | T7 RNA 聚合酶 | 1000KU |
abs60166 | 2 氧甲基轉移酶 | 50000U | |
abs60152 | 牛痘病毒加帽酶 | 10000KU | |
合成帽結構 | abs60182 | Abs Cap AG | 100ul |
abs60183 | Abs Cap GG | 100ul | |
abs60184 | Abs Cap AU | 100ul | |
abs60318 | Abs Cap m6AG | 10ul | |
abs60319 | Abs Cap2 AG | 10ul | |
abs60320 | Abs Cap2 m6AG | 10ul | |
abs60321 | 體內天然帽結構類似物組合 | 1kit |
四、RNA純化及檢測
分類 | 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
RNA純化 | abs9259 | 無酶無菌水(DEPC水) | 500ml |
abs7992 | Oligo(dT)18磁珠(1um) | 1ml | |
abs7986 | 羧基磁珠(1um) | 10ml | |
雙鏈RNA 檢測 | abs590002 | 雙鏈RNA(dsRNA)ELISA檢測試劑盒(K1) | 96T |
五、mRNA相關其他產品推薦
貨號 | 產品名稱 | 規格 | 產品特征 |
abs60174 | Cas9 mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60190 | Cas9 nickase mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60176 | EGFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60178 | Fluc mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60180 | mcherry mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60192 | EBFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60193 | ECFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60195 | mBanana mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60196 | mHoneydew mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60197 | mKate mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60198 | mOrange mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60199 | mPlum mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60311 | mtangerine mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60313 | tdTomato mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60314 | YFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60191 | Cre mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60194 | EPO mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60312 | OVA mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60315 | β-gal mRNA | 100ug×10 | 新鮮現貨 |
abs60332 | Endless eGFP mRNA | 50ug | 新鮮現貨 |
abs60333 | Endless Fluc mRNA | 50ug | 新鮮現貨 |
abs60334 | Endless mcherry mRNA | 50ug | 新鮮現貨 |
abs60335 | Endless Cas9 mRNA | 50ug | 新鮮現貨 |
abs60336 | Endless EPO mRNA | 50ug | 新鮮現貨 |
備注:所有工具RNA均使用 Cap AG結構共轉錄加帽,修飾堿基5種可任選其一(5-Methoxy-UTP,5-Methyl-CTP,N1-Methylpseudo-UTP,N6-Methyl-ATP,Pseudo-UTP。) |
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