mIHC在腫瘤免疫浸潤和趨化因子受體表達研究的應用：
 

多重熒光免疫組化技術（mIHC）利用酪氨信號放大技術（TSA），對不同抗原進行多輪次染色標記，可對單一切片進行至多六指標七色的染色，對于研究多種細胞之間的原位相互作用很有幫助，涉及到研究多細胞或多指標之間相互作用的領域都可以采用mIHC的技術替代傳統的IHC或IF，來獲得更高通量的研究結果。主要的應用領域如下圖所示： 
文章展示了多重熒光免疫組化技術的多種應用和數據分析策略，今天我們就來詳細解讀一下。

在mIHC的發展中，大多數應用mIHC的研究集中在腫瘤相關領域，腫瘤微環境及藥效評估方面應用尤其多，之前的文章中小編也已經為大家多次分享了相關應用，感興趣的小伙伴們可以查閱之前的文章。 
今天再和大家分享一篇多重熒光免疫組化腫瘤免疫浸潤和趨化因子受體表達研究的應用，幫助大家更好的理解mIHC。

這項亞研究利用多重免疫組化(mIHC)和轉錄組分析，從7個可用的2期臨床試驗患者中篩選匹配的治療前后腫瘤標本，研究新輔助IRX-2導致LI增加的機制。多重免疫組化顯示cd68表達細胞(5例)、t細胞密度(4例)和PDL1平均熒光強度(4例)顯著增加。與IRX-2激活多種免疫細胞一致，轉錄組分析顯示NK細胞、B細胞、CD4C T細胞、CD8C T細胞和樹突狀細胞相關基因的表達平均增加，而中性粒細胞相關基因的表達則沒有增加。大多數免疫亞群基因的平均表達增加，比較明顯的是B細胞和樹突狀細胞(2 ~ 3倍)。

圖1到7中的分布圖顯示了每個患者切除前和切除后匹配的腫瘤標本的免疫亞群基因表達譜。多重免疫組化圖像顯示了IRX-2治療前后腫瘤組織中免疫細胞種類的數量和分布的變化。在大多數情況下，個體患者的數據證明了多重免疫組化和轉錄組分析結果之間的一致性。數據顯示，在反應程度方面存在異質性，7例患者中有6例患者治療后CD3C T細胞和CD68C巨噬細胞明顯增加。

作者研究了在7個亞研究患者中，IRX-2治療前后PDL1平均熒光強度(MFI)的總體變化。 7例患者中有2例Foxp3基因表達下降。Foxp3基因的平均表達從治療前活檢的7.17下降到切除腫瘤樣本的7.03 (log2量表)，7例患者中有4例CD4CFoxp3C細胞通過多重免疫組化檢測下降

mIHC方法可以允許在一張切片上同時標記多種marker，可以原位的展現多種細胞之間的相互作用，在臨床科研和疾病診斷中都有很大的潛力，今天小編給大家分析的在腎臟移植排異反應研究中的應用就是如此，mIHC方法的應用，幫助科學家發現更精細的免疫細胞募集區域，為探秘臨床減輕排異反應提供了更多可能性。
今天的分享就到這了，感興趣的小伙伴們可以關注愛必信的多重熒光免疫組化試劑盒及實驗服務，相信看文章的你們也可以得到這樣漂亮實驗結果和好的實驗發現！

【愛必信mIHC服務】

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Absin多重熒光免疫組化服務提供預實驗驗證-染色-拍照-分析全過程。
高達六指標七色（含DAPI）的多色免疫組化服務（芯片高達四指標五色），樣本涵蓋石蠟切片、冰凍切片及組織芯片（TMA），組織大片請提供單塊組織切片，FFPE樣本，厚度3-5um。正式實驗比較好每例2張，1張備用。預實驗樣本數量根據預實驗方案定。

(* 所有抗體指標需要您提供)

* 我們可以提供的服務結果：

1.五色及以下提供全片200X（相當于物鏡20X，目鏡10X）原圖，六七色提供視野200X圖片，選定視野一般默認3視野，超過視野單獨收費，收費標準根據具體情況訂，提供看圖軟件可在客戶端打開。數據上傳網盤1G以內，或用U盤寄送1G以上。
2.客戶要求區域的單細胞分析結果：

• 單陽性細胞占有核細胞百分比，密度。
• 雙陽性細胞占有核細胞百分比，密度。
• 組織面積和特定病理形態面積計算。
• TMA提供每個芯點的以上定量結果。

Absin多色試劑盒（abs50032） 

組分信息： SuperNova系列染料（可選）、信號放大反應液、鼠兔通用型或者抗兔抗鼠HRP標記二抗、抗熒光淬滅封片劑、DAPI
產品特點： 可快速完成高達六指標七色的熒光多標記； 染料經過優化處理，相比普通染料，強度更高，持續時間更長； 有組化經驗即可操作，染色無需特殊儀器，提供詳細的protocol