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ECL化學發光檢測試劑盒常見問題

更新時間:2019-10-30      點擊次數:2202

 愛必信熱賣單品ECL化學發光檢測試劑盒,靈敏度更高,背景更低,穩定性更好。常備現貨, 小編整理了ECL 的常見問題,助您的實驗更順利!

 

問題原因   方法
白色條帶黑色背景體系中HRP過量   進一步稀釋HRP 標記
膜上有棕色或黃色條帶
背景發亮
信號弱或無信號HRP過量,消耗底物   進一步稀釋HRP 標記
抗原或抗體不足   增加抗體
   使用超級ECL
轉膜失敗   優化轉膜條件
HRP 活性低   測試HRP 活性:暗室中,將1ul未稀釋的HRP 放入裝有1-2ml的基質工作
   溶液的試管中。 幾分鐘內,溶液會立即發出藍光。
高背景HRP過量,消耗底物   進一步稀釋HRP 標記
封閉不充分或使用了不適當的封閉試劑   優化轉膜條件
洗滌不充分   增加洗滌時間和次數
膜過度曝光   減少曝光時間
抗原、抗體 過量   減少抗體上樣量
抗體特異性差   優化抗體特異性
條帶有斑點轉膜失敗   優化轉膜條件
x射線膠片與膜之間有氣泡   去除所有氣泡后,再曝光到膠片上
背景有斑點形成聚合體   使用前通過0.2um過濾器過濾hrp -偶聯物
電泳轉移過程中溫度過高   控制電泳和轉移過程中的溫度
非特異性條帶HRP-偶聯物過量   進一步稀釋hrp -偶聯物
SDS導致非特異性蛋白結合   在免疫檢測過程中不要使用SDS
抗體特異性差   優化抗體特異性

 

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